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      詳解探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性

      發布時間:2023-02-24 點擊量:202
        探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,大程度地避免了非特異擴增;反應緩沖液經充分優化,反應靈敏快速,多個循環只需二十多分鐘;抗干擾的能力強,反應重復性好,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
        探針法熒光定量PCR試劑盒安全使用注意:
        使用前請上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經短暫離心后使用。
        所有操作嚴格按照說明書進行;
        反應液應避光保存;
        避免反復凍融,開啟后盡量在三個月內使用完畢。
        試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;
        反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需I蓋緊;
        使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服;
        樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染。
        探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性:
        樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
        陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;
        病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
        樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;
        不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;
        試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果。
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